UNAM CCH-SUR
BIOLOGÍA
La acción de la amilasa sobre el almidón.
Actividad experimental 2.
Acción de la amilasa sobre el almidón
Preguntas generadoras:
1. ¿Cómo actúa la amilasa sobre el almidón?
La enzima amilasa degrada el almidón para así formar azucares más simples como la glucosa, es decir, de moléculas complejas pasa a moléculas simples. Las moléculas de glucosa atraviesan la pared intestinal y posteriormente llegan a la sangre.
2. ¿Cómo está formado el almidón químicamente?
El almidón es un polisacárido formado por la polimerización de miles de monómeros de glucosa que forman largas cadenas. El almidón está realmente formado por una mezcla de dos sustancias, amilasa y amilo pectina.
3. ¿Qué es la amilasa desde el punto de vista químico?
La amilasa es un enzima que tiene la función de digerir el glicógeno y el almidón para formar azúcares simples, se produce principalmente en las glándulas salivares y en el páncreas. Es una biomolecula.
4. ¿Cuál es papel que desempeña el almidón en los animales?
Los carbohidratos son nutrientes esenciales, el almidón es un carbohidrato que proporciona energía a los animales para sus actividades locomotrices
5. ¿Por qué es necesario para los animales que la amilasa actúe sobre el almidón?
Porque si la amilasa no actuara sobre el almidón, el almidón no podría ser degradado en moléculas simples, la glucosa, y no podría ser absorbida por las células.
Hipótesis:
El almidón es un polisacárido y la amilasa una enzima que se encuentra en las glándulas salivares. La amilasa romperá los enlaces de almidón y dará como resultado la amilosa, amilopectina y finalmente glucosa.
La prueba del yodo nos permitirá identificar la presencia de almidón pues tomará un color azul, por otra parte, la prueba de Benedict nos permite identificar a los azúcares reductores y para saber si este es positivo, el color que tomará será rojo ladrillo.
Introducción.
Las enzimas son catalizadores que aceleran la velocidad de las reacciones metabólicas
Para el proceso de digestión, las biomoleculas ingeridas en la dieta deben ser degradadas a sus componentes más sencillos para ser absorbidas a nivel del tubo digestivo y así llegar al lugar correspondiente a nivel celular.
La digestión de los carbohidratos comienza en la boca, donde los alimentos se mezclan con la Amilasa salival que degrada los enlaces del almidón liberándose Maltosa, Glucosa y dextrinas de almidón que poseen todos los enlaces. La acción de las enzimas, por sus características físico-químicas, puede afectarse por las condiciones presentes en el lugar de acción de éstas. Entre los principales factores que pueden modificar la acción enzimática tenemos:
. La temperatura:
. El pH:
. Inductores e inhibidores:
Los inhibidores tienen gran utilidad en bioquímica, ya que ayudan a determinar la especificidad de la enzima por el sustrato, la naturaleza de los grupos funcionales en el mantenimiento de la estructura activa de la enzima. Estos compuestos no son alterados químicamente por la enzima.
De acuerdo al tipo de inhibición que ejerzan éstas sustancias, se han clasificado en :
• Inhibidores Reversibles.
• Inhibidores Irreversibles
Material:
Papel filtro
Embudo
5 tubos de ensayo
2 goteros
2 cápsulas de porcelana
Material biológico:
Muestra de saliva
Sustancias:
Agua destilada
Almidón
Reactivo de Benedict
Reactivo de Lugol para almidón
Equipo:
Balanza granataria electrónica
Parrilla con agitador magnético
Procedimiento:
A. Obtención de la enzima amilasa
Después de enjuagar la boca, mastica un trozo de papel filtro para estimular la salivación. Los líquidos segregados se van pasando a un embudo que tenga un papel filtro, el filtrado se coloca en un tubo de ensayo hasta obtener 1 ml.
La saliva así obtenida se diluye empleando 1ml de saliva y 10 ml de agua destilada, así se obtiene la preparación de enzima base.
Se prepara una solución al 2% de almidón, para lo cual se pesan 2 g de almidón y se disuelven en 100 ml de agua destilada
Se colocan 2 ml de agua destilada en un tubo de ensayo se le agregan 2 ml de la solución de almidón al 2% y 2 ml de la solución base de la enzima. En otro tubo se colocan 2 ml de agua destilada y se le agregan 2 ml de la solución de almidón al 2%.
Los tubos se colocan en baño maría a 37° C, durante 15 minutos dejando que la amilasa vaya hidrolizando al almidón
Una vez transcurridos los 15 minutos se sacarán los tubos del baño maría y se harán las pruebas del lugol y Benedict
B. Reacciones de lugol para almidón y Benedict
La prueba del yodo o el lugol permite identificar la presencia de almidón, con este reactivo se obtiene un color azul-violeta característico. Toma 1 ml de la disolución de cada uno de los tubos y añade unas gotas de lugol a cada una de ellas. Si no existe la hidrólisis del almidón la prueba será positiva.
La prueba de Benedict permite identificar a los azucares reductores. Toma 1 ml de cada uno de las disoluciones de los tubos y agrégales 1 ml del reactivo de Benedict, enseguida coloca ambos tubos en baño María, si existe hidrólisis del almidón se formará un precipitado rojo ladrillo que indica la presencia de azúcares como la glucosa y la maltosa.
Resultados:
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Contenido del Tubo
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Reacción de Lugol
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Reacción de Benedict
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Amilasa+ almidón +agua
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No reacciono
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Si reacciono
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Almidón+agua
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Si reacciono
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No reacción.
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Análisis de resultados.
Enzima
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Catalizador que acelera la reacción química.
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Digestión química
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Transforma los nutrientes en compuestos más simples.
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Digestión mecánica
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Reduce los alimentos en pedazos más pequeños.
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Degradación
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Está relacionado con la reacción de las moléculas grandes de los polímeros, las cuales solamente contienen carbón e hidrogeno, con el oxigeno del aire.
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Saliva
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Es un fluido orgánico complejo producido por las glándulas salivales en la cavidad bucal, y directamente involucrada en la primera fase de la digestión.
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Azucares simples
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Los azúcares simples realizan numerosas funciones en los seres vivos:
• Fuente rápida de energía
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Azucares complejas
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Polímeros
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Son macromoléculas
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Monómeros
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Son micro moléculas
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Replanteamiento de las predicciones:
Al realizar la práctica pudimos concluir que en la saliva se encuentra una enzima llamada amilasa, que actúa sobre el almidón, al ver las reacciones de la saliva (en la cual se encuentra la amilasa) con el lugol para almidón y con el Benedict, ya que en la reacción de la saliva con el lugol se torná un color azul-violeta lo cual indica lapresencia de almidón, pudimos distinguir en que tubo de ensayo se dio la hidrólisis del almidón y en cual no.
Nos sirvió para identificar cuando hay presencia de almidón en el caso de la prueba de Lugol y cuando hay azucares en el caso de la prueba de Benedict.
Autodiscusión
Fue una práctica sencilla de comprender, pero muy lenta, pero al final de cuentas salieron los colores de las reacciones.
Bibliografía.
Curtis, Helena, Barnes N. Sue, Biologia, Madrid, España, Editorial Panamericana, 8ª edición, 2003, pp. 70-100.
Programa Biología III, agosto 2010,
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